Микроба. микроба. Поняття інфекційний процес та інфекційне захворювання

• Название: Поняття інфекційний процес та інфекційне захворювання
• Анкор: Микроба
• Дата: 27.10.2020
• Размер: 230.39 Kb.
• Имя файла: микроба.docx
• Тип: Документы; #146196
• страница: 18 из 22

Реакція аглютинації. Механізм, роль окремих інгредієнтів, діагностичне застосування.

Реакції аглютинації — це прості реакції склеювання корпускулярних антигенів за допомогою антитіл.
Розрізняють:
— прямі реакції аглютинації, що використовують для виявлення антитіл у сироватці крові хворого. Додавання суспензії убитих мікробів до сироватки хворого викликає утворення пластівчастого осаду (позитивна реакція склеювання мікробів антитілами). Використовується для визначення черевного тифу, паратифу й ін.

— реакція пасивної, чи непрямий гемагглютинації заснована на використанні еритроцитів з адсорбованими на їхнє поверхні антигенами, взаємодія яких з відповідними антитілами сироватки крові хворих приводить до утворення фестончатого осаду. Використовується для визначення вагітності, виявлення підвищеної чутливості хворих до лікарських препаратів і гормонів;

— реакція гальмування гемагглютинації заснована на здатності антитіл імунної сироватки нейтралізувати віруси, що у результаті утрачають властивість склеювати еритроцити. Використовується для діагностики вірусних хвороб;

— реакція коагглютинації — різновид реакції аглютинації, у якій антигени збудника визначають за допомогою стафілококів, попередньо оброблених імунною діагностичною сироваткою

6. Реакція пасивної гемаглютинації

реакція пасивної, чи непрямий гемагглютинації заснована на використанні еритроцитів з адсорбованими на їхнє поверхні антигенами, взаємодія яких з відповідними антитілами сироватки крові хворих приводить до утворення фестончатого осаду. Використовується для визначення вагітності, виявлення підвищеної чутливості хворих до лікарських препаратів і гормонів;

6. Реакція гальмування пасивної гемаглютинації

(РГГА) використовується для встановлення видової та типової належності вірусів, зокрема вірусів грипу. В основу реакції покладена здатність вірусів адсорбуватися на еритроцитах і викликати їх неспецифічну аглютинацію. Гемаглютинуюча активність вірусів може бути пригнічена специфічними антитілами, які нейтралізують віруси. Для

виявлення серотипу віруса, виділеного від хворого, використовують специфічні діагностичні протигрипозні сироватки А1, А2 і В. Реакція здійснюється у лунках плексиглазових пластинок. У лунки вносять проби сироваток по 0,25 мл у наростаючих розведеннях і потім додають по 0,25 мл рідини, що містить віруси у робочому розведенні. Робоче розведення досліджуваного віруса визначається передчасно в реакції гемаглютинації. Суміш у лунках взбовтують та інкубують при кімнатній температурі протягом 1- 2 год., після чого у всі лунки додають по 0,5 мл суспезії еритроцитів півня.

Через 1-2 год аналізують результати реакції. В тих рядах, де діагностичні сироватки не специфічні до віруса, буде спостерігатися гемаглютинація у вигляді зонтиків. І навпроти, якщо антитіла діагностичної сироватки будуть зв’язувати і нейтралізувати віруси, гемаглютинація буде пригнічуватись і еритроцити будуть зсідатися у вигляді пуговок. Типова приналежність віруса грипа визначається по тій специфічній сироватці, яка виявила пригнічення гемаглютинації у найвищих титрах.

6. Метод виявлення неповних антитіл (проба Кумбса)

Кумбса – різновид реакції аглютинації для виявлення неповних блокуючих антитіл – Ig з одним активним центром. Може виконуватись як пряма, так і як пасивна аглютинація. Неповні антитіла з’єднуються з антигеном, але не здатні утворювати з ним великі агрегати, із-за чого реакція не візуалізується. Тому для виявлення специфічного зв’язування антигена з антитілом використовують антиглобулінову сироватку, яка містить

імуноглобуліни проти неповних антитіл. Реакцію здійснюють у 2 етапи:

• 
  інкубують досліджувану сироватку (неповні антитіла) з відповідним
  

діагностикумом – антигеном, реакція не візуалізується;

• 
  до інкубаційної суміші додають антиглобулінову сироватку, антитіла якої зв’язуються з Fc-фрагментами неповних антитіл, вже утворивших комплекси з антигеном. При
  

специфічній відповідності неповних антитіл антигенам (позитивна реакція) на другому етапі виявляється аглютинація.

6. Реакція аглютинації на склі (серологічна ідентифікація збудника)

РА-(от лат. agglutinatio - склеивание) - склеивание корпускул (бактерий, эритроцитов и др.) антителами в присутствии электролитов - натрия хлорида.

• 
  проявляется в виде хлопьев или осадка, состоящих из корпускул (например, бактерий), "склеенных" антителами.
  

РА используют для:

1. 
   Определения возбудителя, выделенного от больного животного
   
2. 
   Определения антител в сыворотке крови больного животного
   

Определение возбудителя

Ориентировочная реакция агглютинации на стекле.

К капле агглютинирующей сыворотки

(разведение 1 : 20) добавляют взвесь бактерии,

выделенных от больного животного. Образуется

хлопьевидный осадок.

Развернутая реакция агглютинации с

возбудителем, выделенным от больного животного. К разведениям агглютинирующей

сыворотки добавляют взвесь бактерий, выделенных от больного.

Определение антител в сыворотке крови

Развернутая реакция агглютинации ссывороткой крови. К разведениям сыворотки

добавляют диагностикум.

1. Агглютинация с О-диагностикумом (бактерии, убитые нагреванием, сохранившие O- антиген) происходит в виде мелкозернистой агглютинации.

2. Агглютинация с Н – диагностикумом (бактерии, убитые формалином,сохранившие жгутиковый Нантиген) - крупнохлопчатая и протекает быстрее.