Тец руководство. Руководство к практаческим занятиям по медицинской микробиологии, вирусологии и иммунологии под редакцией
 Скачать 2.14 Mb.
|
|
Учебная литература медицинских вузов для студентов РУКОВОДСТВО К ПРАКТАЧЕСКИМ ЗАНЯТИЯМ ПО МЕДИЦИНСКОЙ МИКРОБИОЛОГИИ, ВИРУСОЛОГИИ И ИММУНОЛОГИИ Под редакцией доктора медицинских наук, профессора В.В.Теца Издание второе, переработанное и дополненное Допущено Департаментом образовательных медицинских учреждений и кадровой политики Министерства здравоохранения Российской Федерации в качестве учебного пособия для студентов медицинских вузов Москва "Медицина" 2002 Руководство к практическим занятиям по медицинской Р85 микробиологии, вирусологии и иммунологии/Под ред. В.В.Теца. — Изд. 2-е, перераб. и доп. — М.: Медицина, 2002. - 352 с.: ил. ISBN 5-225-04644-4 Настоящее руководство представляет собой 2-е издание "Руководства к лабораторным занятиям по медицинской микробиологии, вирусологии и иммунологии" (М.: Медицина, 1993), все разделы которого кардинально переработаны проф. В.В.Тецем, проф. И.С.Фрейдлин и доц. Е.Н.Шмидт. Руководство рекомендуется для самостоятельной подготовки к практическим занятиям. Изложены общие сведения о методах изучения микробов. Рассказано о методах стерилизации, дезинфекции и определении чувствительности микробов к антибиотикам. Описаны основы прикладной иммунологии. Приведены современные методы диагностики многих инфекций. Для студентов медицинских вузов. ББК 52.64 Авторы выражают благодарность &.К.Артеменко и В. И. Кура-новой за помощь в подготовке р&пмЪ* к изданию. • • ISBN 5-225-04644-4 ^ g /©^Ъллектив авторов, 2002 Все права авторов защищены. 10f odnfj^c-mb этого издания не может быть занесена в память компьютера Либо вйКюивведена любым способом без предварительного письменного разрешения иЗщлпеЛя. Коллектив авторов
Часть I. Общая медицинская микробиология, вирусология и иммунология
Список сокращений БГКП — бактерии группы кишечной палочки ВИЧ — вирус иммунодефицита человека ГЖХ — газожидкостная хроматография ГЗТ — гиперчувствительность замедленного типа ЖСА — желточно-солевой агар ИФ — иммунофлюоресценция ИФА — иммуноферментный анализ ИЭМ — иммуноэлектронная микроскопия ИЭФ — иммуноэлектрофорез КОЕ — колониеобразующие единицы КС — клеточная стенка ЛПС — липополисахарид МКАТ — моноклональные антитела МПА — мясопептонный агар МПК — минимальная подавляющая концентрация НК — нуклеиновая кислота ООИ — особо опасная инфекция ОРВИ — острая респираторная вирусная инфекция ОРЗ — острое респираторное заболевание ПМ — плазматическая мембрана ПЦР — полимеразная цепная реакция РА — реакция агглютинации РГА — реакция гемагглютинации РИА — радиоиммунный анализ РН — реакция нейтрализации РИГА — реакция непрямой гемагглютинации PC К — реакция связывания комплемента РТГА — реакция торможения гемагглютинации СМЖ — спинномозговая жидкость СПИД — синдром приобретенного иммунодефицита ЦПД — цитопатическое действие ЧК — чистая культура CTL — цитотоксические лимфоциты MAC — комплекс Mycobacterium tuberculosis МТС — комплекс Mycobacterium avium spp. — виды (species) Часть I ОБЩАЯ МЕДИЦИНСКАЯ МИКРОБИОЛОГИЯ, ВИРУСОЛОГИЯ И ИММУНОЛОГИЯ Глава 1 МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИЕ ЛАБОРАТОРИИИ ИХ ОБОРУДОВАНИЕ Введение. Все микробиологические, биохимические и моле-кулярно-биологические исследования микроорганизмов проводят в специальных лабораториях, структура и оборудование которых зависят от объектов исследования (бактерий, вирусов, грибов, простейших), а также от их целевой направленности (научные исследования, диагностика заболеваний). Изучение иммунного ответа и серодиагностика заболеваний человека и животных осуществляют в иммунологических и серологических (serum — сыворотка крови) лабораториях. Бактериологические, вирусологические, микологические и серологические (иммунологические) лаборатории входят в состав санитарно-эпидемиологических станций (СЭС), диагностических центров и крупных больниц. В лабораториях СЭС выполняют бактериологические, вирусологические и серологические анализы материалов, полученных от больных и контактировавших с ними лиц, обследуют бактерионосителей и проводят санитарно-микробиологические исследования воды, воздуха, почвы, пищевых продуктов и т.д. В бактериологических и серологических лабораториях больниц и диагностических центров проводят исследования с целью диагностики кишечных, гнойных, респираторных и других инфекционных заболеваний, осуществляют микробиологический контроль за стерилизацией и дезинфекцией. Диагностику особо опасных инфекций (чума, туляремия, сибирская язва и др.) проводят в специальных режимных лабораториях, организация и порядок деятельности которых строго регламентированы. В вирусологических лабораториях диагностируют заболевания, вызванные вирусами (грипп, гепатит, полиомиелит и др.), некоторыми бактериями — хламидиями (орнитоз и др.) и рик-кетсиями (сыпной тиф, Ку-лихорадка и др.). При организации и оборудовании вирусологических лабораторий учитывают специфику работы с вирусами, культурами клеток и куриными эмбрионами, требующую строжайшей асептики. В микологических лабораториях проводят диагностику заболеваний, вызываемых патогенными грибами, возбудителями микозов. Лаборатории обычно размещаются в нескольких помещениях, площадь которых определяется объемом работ и целевым назначением. В каждой лаборатории предусмотрены: а) боксы для работы с отдельными группами возбудителей; б) помещения для серологических исследований; в) помещения для мойки и стерилизации посуды, приготовления питательных сред; г) виварий с боксами для здоровых и подопытных животных; д) регистратура для приема и выдачи анализов. Наряду с этими помещениями в вирусологических лабораториях имеются боксы для специальной обработки исследуемого материала и работы с культурами клеток. Оборудование микробиологических лабораторий. Лаборатории снабжены рядом обязательных приборов и аппаратов. Приборы для микроскопии: биологический иммерсионный микроскоп с дополнительными приспособлениями (осветитель, фазово-контрастное устройство, темнопольный конденсор и др.), люминесцентный микроскоп. Термостаты и холодильники. Приборы для приготовления питательных сред, растворов и т.д.: аппарат для получения дистиллированной воды (дистиллятор), технические и аналитические весы, рН-метры, аппаратура для фильтрования, водяные бани, центрифуги. Набор инструментов для манипуляций с микробами: бактериологические петли, шпатели, иглы, пинцеты и др. Лабораторная посуда: пробирки, колбы, чашки Петри, матрацы, флаконы, ампулы, пастеровские и градуированные пипетки и др., аппарат для изготовления ватно-марлевых про бок. Крупные диагностические комплексы имеют автоматические анализаторы и компьютеризированную систему оценки полученной информации. В лаборатории выделено место для окраски микроскопических препаратов, где находятся растворы специальных красителей, спирт, кислоты, фильтровальная бумага и др. Каждое рабочее место снабжено газовой горелкой или спиртовкой и емкостью с дезинфицирующим раствором. Для повседневной работы лаборатория должна располагать необходимыми питательными средами, химическими реактивами, диагностическими препаратами и другими материалами. В крупных лабораториях имеются термостатные комнаты Для массового выращивания микроорганизмов, постановки серологических реакций. Для выращивания, хранения культур, стерилизации лабораторной посуды и других целей используют следующую аппаратуру. Термостат. Аппарат, в котором поддерживается постоянная температура. Оптимальная температура для размножения большинства патогенных микроорганизмов 37 °С. Термостаты бывают воздушными и водяными. Микроанаэростат. Аппарат для выращивания микроорганизмов в анаэробных условиях. СО2 -инкубатор. Аппарат для создания постоянной температуры и атмосферы определенного газового состава. Предназначен для культивирования микроорганизмов, требовательных к газовому составу атмосферы. Холодильники. Используют в микробиологических лабораториях для хранения культур микроорганизмов, питательных сред, крови, вакцин, сывороток и прочих биологически активных препаратов при температуре около 4 "С. Для хранения препаратов при температуре ниже О °С применяют низкотемпературные холодильники, в которых поддерживается температура -20 °С или -75 'С. Центрифуги. Применяют для осаждения микроорганизмов, эритроцитов и других клеток, для разделения неоднородных жидкостей (эмульсии, суспензии). В лабораториях используют центрифуги с различными режимами работы. Сушилъно-стершшзационный шкаф (печь Пастера). Предназначен для суховоздушной стерилизации стеклянной лабораторной посуды и других жаростойких материалов. Стерилизатор паровой (автоклав). Предназначен для стерилизации перегретым водяным паром (под давлением). В микробиологических лабораториях используют автоклавы разных моделей (вертикальные, горизонтальные, стационарные, переносные). |