Задание с какой целью доставлен исследуемый материал в лабораторию Ответ
Скачать 2.77 Mb.
|
Задание 157 В лаборатории по диагностике особо опасных инфекций из испражнений больного Н.,который госпитализирован в инфекционное отделение с диагнозом «острый гастроэнтерит», выделена чистая культура бактерий, представляющая собой грамотрицательные, слегка изогнутые палочки, подвижные, ферментирующие сахарозу и маннозу с образованием кислоты, агглютинирующиеся О-холерной сывороткой. Задания 1.На каких средах выделена эта чистая культура от больного Н.? 2.Определите вид выделенного возбудителя на основании этих признаков. 3.Дополните указанные исследования тестами,необходимыми для окончательной идентификации выделенной культуры. Эталоны ответов На щелочной 1% пептонной воде,щелочном МПА,TCBS,лактозо-сахарозной среде. Холерный вибрион. Необходимо определить хемовар,биовар и серовар выделенного возбудителя. Определить хемовар по изучению биохимических свойств в углеводном ряду, состоящем из маннозы,сахарозы и арабинозы. Изучить способность гемолизировать эритроциты барана и чувствительность к полимиксину. Проверить фаголизабельность фагами С и Эль-Тор 2. Определить серовар в реакции агглютинации с типовыми сыворотками Инаба, Огава. Для идентификации можно использовать и ряд дополнительных тестов: оксидазный тест,тест окисления ферментации,тест"тяжа", реакцию гемагглютинации куриных эритроцитов,гексаминовый тест. Задание 158 В городе Н. в августе 1971 г. отмечались случаи заболевания холерой (неблагоприятная эпидемическая форме №30). Выделенная в лаборатории особо опасных инфекций этого города из рвотных масс больного С., поступивших на исследование с диагнозом «холера?», культура оказалась подвижной, в окрашенных мазках-грамотрицательные, слегка изогнутые палочки, при росте на среде Ресселя (лактозо-сахарная среда) изменялся цвет нижней части (столбик) без газооб- разования, в пестром ряду, состоящем из сахарозы, маннозы и арабинозы, отсутствовала ферментация арабинозы, а сахарозу и маннозу микроорганизмы ферментировали с образованием кислоты: проходила выраженная агглютинация с О-холерной сывороткой, наблюдался гемолиз эритроцитов барана. Задания 1.Каким исследованием необходимо дополнить идентификацию культуры, чтобы определить биовар? 2. Дайте полное название выделенной культуры на латинском языке с указанием биоваров, типичных для человека. 3. К какой группе по классификации Хeйберга относится этот вид микроорганизмов. Эталоны ответов Для установления биовара необходимо использовать фаги Эль-Тор 2 и с их помощью определить лизабельность культуры. Выделен холерный вибрион Эль-Тор-Vibrio choleraе (EI-Tor или classica). Хемовар 1 группы по классификации Хейберга. Задание 159 В инфекционное отделение машиной скорой помощи доставлен Р. 38 лет, в тяжелом состоянии. Как удалось выяснить у больного, на протяжении 2-х дней был частый жидкий стул. а через 5 часов от начала заболевания присоединилась рвота, вначале содержимым желудка, а затем жидкостью, напоминающей рисовый отвар. В течение дня у него 20 раз был жидкий стул и 7 раз рвота. При осмотре обращали на себя заострившиеся черты лица, с темными кругами под глазами, охриплость голоса и снижение тургора кожи кистей рук (рука прачки). Живот безболезненный, язык сухой. У дежурного вра- ча возникло подозрение, что у больного Р. холера. Он госпитализировал его в боксированное отделение, вызвал заведующего инфекционным отделением. Срочно направил кал и рвотные массы в лабораторию особо опасных инфекций с необходимыми мерами предосторожности. Задания 1. Каким образом был взят исследуемый материал у больного Р. и доставлен в лабораторию особо опасных инфекций? 2. Как Вы оформите направление в лабораторию особо опасных инфекций? 3. Как будет проводиться бактериологическое исследование в лаборатории особо опасных инфекций? 4. Какие результаты исследований позволят врачу- бактериологy дать заключение что в исследуемом содержатся Vibrio choleraе? 5. Что необходимо включить в комплекс лечебных мероприятий для лечения нарушением этого больного? 6. Какие противоэпидемические мероприятия рекомендуется провести очаге? 7. Достаточно ли данных для утверждения о том что обследованный пациент болен холерой? Эталоны ответов 1.1. Поскольку холерный вибрион очень чувствителен к различным дезинфицирующим средствам, поэтому в посуде для сбора материала от больных не должно быть даже слабых концентраций дезинфицирующих средств. Посуда перед сбором материала подвергается кипячению. 1.2. Испражнения и рвотные массы собирают в стерильные стеклянные широкогорлые баночки. 1.3. Допускается взятие материала ректальными тампонами, стеклянными трубками. В таких случаях материал нужно обязательно помещать в пробирку с щелочной 1% пептонной водой. 1.4. Баночки или пробирки плотно закрывают пробкой, обязывают двойным слоем пергаментной бумаги или другим водонепроницаемым материалом. 1.5. На баночку или пробирку наклеивают этикетку с фамилией больного, названием образца, обозначением места времени взятия материала, предполагаемым диагнозом и фамилией лица, взявшего материала. 1.6. При пересылке исследуемого материала отдаленные лаборатории банки с материалом плотно укладывают металлические сосуды (бикс, кастрюля), помещают в деревянный ящик и опечатывают. На крышке ящика надписывают: "Верх! Осторожно!" 2. В лабораторию по диагностике особо опасных инфекций Направление Больной Р, 38 лет. Диагноз: Холера? Направляются для проведения исследования испражнения. Материал взят в санпропускнике инфекционного отделения 24.06.72 г. в 1200 медсестрой Ивановой Т. Врач: Степанов В. Такое же направление выписывается и при направлении рвотных масс и др. материала. 3.1. Исследуемый материал подвергается бактериоскопии и изучается нативный препарат с целью обнаружения подвижных микроорганизмов. 3.2. Параллельно проводится посев на 1 щелочную 1% пептонную воду и щелочной МПА или селективную среду ТСBS. 3.3. Через 6 часов изучается рост на пептонной воде, готовятся мазки, окрашиваются по Граму. Изучение подвижности в нативных мазках и постановка реакции агглютинации с О-холерной сывороткой. Пересев на II 1 neптонную воду и чашки с щелочным МПА. 3.4. Через 12 часов изучение колоний из первичного посева нативного материала на щелочном МПА, характер роста на II 1% пептонной воде (наличие роста в виде нежной голубоватого цвета пленки). 3.5 Идентификация выделенных чистых культур по морфологии, подвижности, способности ферментировать сахарозу и маннозу с образованием кислоты, лизироваться со специфическим фагом по гемолизу эритроцитов барана, чувствительности к лимиксину и агглютинации типовыми сыворотками Инаба и Огава. 3.6 Исследование чашек засеянных со второй пептонной воды, проводят по той же схеме по которой изучались чашки с посевом первичного материала. 3.7 Предварительный результат можно получить через 6-12 часов, окончательный через 36-48 часов. 4.1 Обнаружение грамотрицательных тонких изогнутых подвижных палочек агглютинирующие на стекле o-холерной сывороткой является достаточным для утверждения что в исследуемом материале имеются вибрионы. 4.2 Чтобы установить биовар хемовар необходимо иметь данные о способности выделенной культуры ферментировать сахарозу и маннозу до кислоты вызывать гемолиз эритроцитов барана и агглютинацию эритроцитов кур лизироваться либо фагом C либо Эль-Тор агглютинироваться специфическими сыворотками Инаба и Огава. 5. В комплекс лечебных мероприятий нужно включить сначала внутривенное затем пероральное введение антибиотиков группы тетрациклина. Обязательно должна проводиться борьба с обезвоживанием организма нарушением обмена веществ последствий токсикоза. Для этих целей назначают введение солевых растворов натрия калия влияние плазмы глюкозы препаратов тонизирующих сердечно-сосудистую систему. 6.1 При обнаружении первого случая холеры информировать вышестоящие органы здравоохранения. 6.2 Изолировать и госпитализировать по особым правилам больных и носителей Используя бактериологический метод диагностики. 6.3 Провести текущую и заключительную дезинфекцию в отделение для больных холерой и в очаге. 6.4 Контролировать охрану источников водоснабжения, усилить санитарный надзор за пищеблоками, борьбу с мухами. 6.5 Провести химиопрофилактика в этом очаге холеры. 7. Да, Если через 6-12 часов из лаборатории по диагностике особо опасных инфекций получены предварительные положительный ответ и наличии в исследуемом материале холерных вибрионов, А через 36-48 часов есть сообщение что выделен или классический холерный вибрион или вибрион Эль Тор. ЗАДАНИЕ № 160 Из испражнений больного с острым гастроэнтеритом, который госпитализирован в инфекционное отделение, в лаборатории диагностике особо опасных инфекций выделена чистая бактериальная культура, которая в течение 6 часов дала рост на щелочной 1% пептонной воде в виде нежной, голубоватой плене. На щелочном МПА через 12 часов после посева испражнения образовывались мелкие, гладкие, выпуклые, стекловидно-прозрачнне колонии с голубоватым оттенком; в мазках, окрашеннных по Граму, обнаружены грамотрицательные, мелкие, слегка изогнутые палочки; в препарате висячей капли обнаружена хорошо выраженная подвижность этих бактерий («полет точки»). ЗАДАНИЯ 1.Каким микроорганизмам, вызывающим острую кишечную инфекцию, присущи эти свойства? 2. Какие тесты идентификации позволят Вам определить видовую принадлежность этих бактерий? 3. На основании каких тестов, использованных при идентификации культуры, можно сделать заключение, что выделены классические холерные вибрионы? ЭТАЛОНЫ ОТВЕТОВ 1. Вибрионам -холерным нли вибрионам Эль-Тор. 2.1. Указанные тесты в условии: морфология и подвижность. 2.2. Обязательно необходимо использовать агглютинацию с 0-холерной сывороткой. 2.3. У выделенной чистой культуры изучить ферментативные свойства: сбраживать без газа сахарозу и маннозу, вызывать гемолиз эритроцитов барана, агглютинацию эритроцитов кур: проявлять чувствительность к полимиксину; лизироваться специфическими фагами и агглютинироваться специфическими типовыми сыворотками Инаба, Огава 2.4. На основании лизабельности фагом С или Эль-Тор 2 и гемолиз эритроцитов барана 3. На основании лизабельности фагом С. отсутствия гемолиза эритроцитов барана, агглютинации куриных эритроцитов и чувствительности к полимиксину. ЗАДАНИЕ № 161 В инфекционное отделение больницы поступил больной Б. с профузным поносом. Испражнения вначале имели цвет и запах кала, а затем стали белесовато-водянистыми, напоминаюцими рисовый отвар. Позже присоединилась рвота фонтаном без тошноты. В лабораторию по диагностике особо опасных инфекций отправлен исследуемый материал, полученный от этого больного. Вначале лаборант провел бактериоскопическое исследованне испражнений и рвотных масс больного. В мазках, окрашенны по Граму, обнаружил большое количество грамотрицательных, слегка изогнутых палочек, располагающихся скоплениями, напоминающими «стайки рыб». Изучение нативных мазков свидетельствовало о подвижности бактерий. ЗАДАНИЯ 1.Какие микроорганизмы обнаружены в исследуемом материале от этого больного? 2. За сколько часов нужно провести бактеориологические исследования, чтобы выделить и идентифицировать обнаруженные микроорганизмы? 3.Какие питательные среды нужно использовать для посева материала от этого больного? 4. На основании каких результатов бактериологического исследования можно сделать предварительное заключение и в какие сроки? ЭТАЛОНЫ ОТВЕТОВ 1.Вибрионы 2.1. Предварительная идентификация 6-12 часов. 2.2. Окончательная-36-48 часов. 3.1. Среды накопления: щелочная 1% пептонная вода. 3.2. Плотные среды для посева материала из сред накопления-щелочно высева МПА. 3.3. Элективные среды: среда ТCBS, среда Монсура. 4.1. Через 6 или 12 часов можно сделать первое предварительное заключение: через 6 часов при пленки на 1 щелочной 1% пептонной воде, через 12 часов-при изучении роста в виде пленки на 2 пентонной воде. 4.2. Предварительное заключение исходит из особенностей морфологии: наличие грамотрицательных, изогнутых, тонких палочек; подвижных паратов; появление через 6 часов роста виде голубоватой нежной пленки на пептонной воде ии равномерное помутненне среды. Кроме того, положительная реакция агглютинации с О-холерной сывороткой. ЗАДАНИЕ № 162 В 1970 г. в августе месяце в портовом городе К. зарегистрированы первые случаи острого кишечного заболевания среди населения, характеризующегося частым жидким стулом (до 20 раз в сутки), который у некоторых напоминал «рисовый отвар», многократной рвотой, обезвоживанием организма у некоторых больных, снижением температуры. Проведенная экспресс-диагностика исследуемого материала (испражнения, рвотные массы) показала, что заболевания вызваны холерным вибрионом Эль-Тор. ЗАДАНИЯ 1. Какие ускоренные методы обнаружения холер-вибрионов использованы могли быть данном случае? 2. Составьте схему исследования (испражнений ротных масс), которая позволит за 6-12 часов обнаружить холерных вибрионов. 3. Какие должны быть проведены в этой лаборатории для установления биовара выделенной культуры Эль-Тор? ЭТАЛОНЫ ОТВЕТОВ 1. В данном случае скорее всего использован люминесцентно-серологический метод проба с типовыми холерными бактериофагами. 2.1. Посеять исследуемый материал (испражнения, рвотвые массы) на 1 щелочную 1% петтонную воду и в щелочной МПА. 2.2. Через 6 часов инкубации при температуре 37 изучить рост на I петтонной воде – при наличии голубоватого цвета нежной пленки приготовить мазки, окрасить по Граму, изучить морфологию, исследовать подвижность и поставить реакцию агглютинации на стекле с О-холерной сывороткой. 2.3. Сделать пересев на 2 пентонную воду и чашки с щелочным МПА (можно со средой МПА) 2.4. Через 12 часов от начала исследования исследуемого материала (4-6 часов инкубации 2 пептонной воды) изучают рост на 2 пептонной воде и чашках с посевом нативного материала. Со второй пептониой воды проводят те же исследования, которые были выполнены с первой пептонной водой. На чашках выбирают колонии, типичные или подозрительные для холерного вибриона. Из наиболее подозрительных колоний готовят мазкн. окрашивают по Граму, изучают морфологию,, а также подвижность в раздавленной капле. Ставят ориентировочную реакцию агглютинации с О-холерной сывороткой, отсевают не менее 5 подозрительных колоний на лактозно-сахарозную среду. скошенный щелочной МПА, а также пробирку с бульоном. 2.5. Характерный рост в виде нежной, голубоватого цвета пленки иа 1% пептонной воде, характерная морфология (грамотрицательные, изогнутые, очень подвижные палочки), а в некоторых случаях положительная ориентировочная реакция агглютинации с пленки дают возможность определить холерный вибрион через 6-12 часов от начала исследования. 2.6. Для установления хемовара и биовара (Эль- Тор. классический) необходима идентификация выделенной чистой культуры на щелочном МПА или лактозо-сахарозной среде. 3.1. Для установления биовара (Эль-Тор. классический) необходима идентификация выделенной чистой культуры, выросшей на щелочном скошенном МПА или лактозо-сахарозной среде. 3.2. Изучить биохимические свойства в углеводном ряду. состоящем из маннозы, сахарозы и арабинозы. 3.3. Изучить фaголизабельность фагами С и Эль-тор 2. 3.4. Проверить чувствительность к полимиксяну, способность агглютинировать куриные эритроциты, гемолизировагь эритроциты барана. ЗАДАНИЕ № 163 В штате Западный Бенгал (Индия) возникли заболевания, проявляющиеся признаками гастроэнтерита. Испражнения рвотные массы у больных напоминали рисовый отвар. У некоторых больных наблюдалось до 40 дефекаций в день, и заболевшие вместе с испражнениями и рвотными массами теряли очень много жидкости, что приводило к обезвоживанию и обессоливанию организма. Поэтому у больных отмечались заострившиеся черты лица, Гасies choleгіса, осиплый голос. При осмотре мышцы контурированы (поза фехтовальщика), пульс нитевидный, сознание затемнено. Врач, осматривавший больных, поставил диагноз «холера?». Все больные госпитализированы, кал и рвотные массы направлены в лабораторию по диагностике осо- бо опасных инфекций, где произведен посев исследуемого материала на 1% щелочную пептонную воду и среду ТCBS. |