Практикум по клин. диагностики. Учебные пособия для студентов высших учебных заведений
 Скачать 5.61 Mb.
|
|
ХИМИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ МОЧИ Цель занятия Овладеть методами определения мочи ее на белок сахар в моче кетоновые тела, кровь, кровяные пигменты желчные и желчные кислоты. Материальное обеспечение Индикаторная бумага реактивы для определения белка, альбумоз, сахара, кетоновых тел, кровяных пигментов желчных пигментов и кислот пробы мо- дающие и отрицательные реакции на сахар, кетоновые тела и т. п. При исследовании химического состава мочи вначале определяют рН, затем ставят реакции на белок сахар, кетоновые кровяные пигменты, миоглобин, индикан, желчные пигменты и кислоты. рН мочи. Его устанавливают с помощью рН-метров или индикаторной бумаги Индикаторную бумагу погружают в мочу и, вынув, сравнивают с цветной шкалой, имеющей соответствующие цифровые обозначения рН. У здоровых животных реакция мочи зависит от состава кормов. У травоядных она слабощелочная или нейтральная, ау плотоядных умеренно кислая. У животных кислая моча бывает при болезнях, сопровождающихся лихорадками, голодании, почечной недостаточности, резкощелочная при уроциститах, рассасывании экссудатов и транссудатов, после рвоты. Определение белка. Для установления содержания белка в моче ставят качественные и количественные пробы проба с су ль ф оса лиц иловой В пробирку наливают мл мочи кислой реакции и добавляют капель раствора сульфосалици- ловой кислоты. При наличии белка образуется помутнение, неисчезающее при подогревании (при содержании альбумоз помутнение исчезает при Проба с сульфосалициловой кислотой одна из самых чувствительных проба с В пробирку берут 1,25 мл прозрачной мочи и добавляют мл раствора сульфосалициловой кислоты. Через 5 мин определяют оптическую плотность пробыв кюветах с рабочей шириной 5 мм при светофильтре нм (оранжевый или красный светофильтр) против контроля. Методика приготовления контроля следующая. В центрифуж- ную пробирку наливают 1,25 мл испытуемой прозрачной мочи и Добавляют к ней 5 мл раствора хлористого натрия. Оптическую плотность измеряют при тех же условиях, что и опытной пробы. Из оптической плотности опыта вычитают оптическую плотность контроля. Расчет проводят по калибровочному графику, построенному на основании разведения стандартного альбумина в растворе хлористого натрия с концентрацией ив мл раствора. Из каждого стандартного разведения берут 1,25 мл и обрабатывают как опытные пробы. К а чес т вен на я проба с азотной В пробирку с мл раствора азотной кислоты осторожно по стенке пробирки приливают мочу так, чтобы обе жидкости не смешивались, а как бы соприкасались. В случае присутствия белка в мочена границе между жидкостями появляется белое кольцо (диск, представляющее собою слой белка, коагулированного азотной кислотой. Кольцо может появиться также при реакции кислоты с другими составными частями мочи. Так моча, содержащая много уратов, образует кольцо, состоящее не из белка, а из уратов и расположенное не на границе между мочой и а в верхнем слое. При легком подогревании уратное кольцо исчезает. Присутствие муцина в моче также можег сопровождаться появлением кольца при постановке этой реакции, но оно находится значительно выше границы между мочой и реактивом и отличается рыхлостью. Появление белка в моче называют в которой выделяют две группы патологического состояния внепочечные и почечные При про- теинуриях белок к моче примешивается походу путей (при уроцистите, уретрите, пиелонефрите, воспалении половых При почечных протеинуриях белок в мочу попадает из почек. Почечные протеинурии бывают функционального и органического происхождения. Функциональные протеинурии появляются вследствие нарушения проницаемости капилляров почек. Их отмечают укоров вдень родов, у новорожденных жеребят в течение первых 3 дн. жизни. Органические это результат поражения паренхимы почек и увеличения проницаемости капилляров клубочков протеинурию наблюдают при гломерулонефритах, нефрозах, застойных явлениях, интоксикациях, часто при инфекционных болезнях. Реналь- и неренальная протеинурии нередко комбинируются. Определение протеоз (альбумоз) в моче. Ставят биуретовую реакцию. К 3 мл подкисленной мочи добавляют около 1 мл насыщенного раствора хлористого натрия. Пробу кипятят, а затем в горячем виде фильтруют. К фильтрату добавляют объема концентрированного раствора гидроокиси натрия и несколько ка- сульфата меди. При положительной реакции получается красно-фиолетовое окрашивание в моче появляются при гнойных, некротических процессах, в послеродовом периоде, при болезнях, сопровождаю- усиленным клеточным распадом Определение сахара. Пробы мочи для исследования на угле- должны быть свежими. При хранении мочи в теплом (не в холодильнике) глюкоза разлагается под действием фер- бактерий, грибов. Для определения сахара в моче пользуются пробами Бени- дикта, экспресс-методом и др. П роба Б е ни дик та. Реактив Бенидикта готовят следующим образом. В мерную колбу емкостью 1 л наливают 700 мл дистиллированной воды, добавляют 173 г цитрата натрия и 100 (или 200 г ' кристаллического) карбоната натрия. Смесь нагревают до растворения всех ее компонентов. Отдельно растворяют 17,3 г сульфата меди в 100 мл дистиллированной воды. Оба раствора смешивают в мерной колбе и после остывания объем их доводят дистиллированной водой дол. Реактив сохраняется хорошо. При постановке реакции в пробирку наливают 5 мл реактива и добавляют капель мочи. Пробу нагревают 2 мин на пламени или 5 мин в кипящей водяной бане. Оставляют пробирку для остывания в течение мин. При окрашивании содержимого пробирки в синий цвет пробу считают отрицательной. При наличии сахара в моче 0,5 г в 100 мл) появляется зеленая, желтая или красная окраска пробы с соответствующим осадком на дне пробирки. Данная проба относится к полуколичествен- ным. Следует иметь ввиду, что при содержании в 100 мл мочи от 0,05 дог глюкозы цвет пробы зеленый, от 0,5 до 1 желтый и красный. П роба Реактив Ниляндера (нитрат висму- 2 г, сегнетовая г раствор гидроокиси нат- 100 раствор, хорошо сохраняющийся в склянке из темного стекла. При продолжительном хранении реактива перед постановкой опыта следует проверять его качество. Для этой цели в пробирку наливают реактив Ниляндера, разбавленный враз водой, и нагревают. Если реактив не испорчен, при кипении жидкость не должна темнеть. С целью постановки пробы к мл реактива Ниляндера до- около 2 мл мочи и нагревают смесь в течение мин. При положительной реакции смесь мутнеет и приобретает окраску от коричневой до черной. Проба выявляет 0,1 г сахара в мл мочи. Однако при содержании в моче значительного количества мочевой и салициловой кислот, гемоглобина проба дает ложноположительную реакцию Для экспресс-определения сахара в мо- используют реактивную бумагу В нормальной моче содержится незначительное количество глюкозы, которое не удается обнаружить обычными качественны- реакциями. Если способность почечных канальцев реабсорби- ровать глюкозу нарушается, тов моче появляется — Физиологическая глюкозурия у животных возникает придаче им кормов, богатых углеводами, иногда она появляется в результате испуга, а также при беременности. Патологическая глюкозурия может быть при сахарном диабете, отравлениях животных соединениями тяжелых металлов, хлоралгидратом, пидаром и другими токсическими веществами, при дистрофии печени, различных воспалительных процессах в головном и спинном мозге. Определение кетоновых тел. Для их обнаружения применяют пробу Лестраде, которую выполняют с реактивом следующего состава нитропруссид г, сульфат 20 г, карбонат натрия (безводный) — 20 г. Указанные вещества тщательно растирают в фарфоровой ступке, смешивают и хранят реактив в темной, хорошо закупоренной стеклянной банке. При постановке пробы на белую бумагу или плитку насыпают небольшое количество сухого порошка, который увлажняют каплями мочи. При наличии кетоновых тел реактив окрашивается от розового до темно-фиолетового цвета. Окрашивание может наступить через мин. В моче здоровых животных содержится мало кетоновых тел, и они не улавливаются пробой Лестраде. Положительная реакция на кетоновые тела в моче (кетонурия) встречается призе коров, кетонурии суягных овец, листериозе, продолжительных желудочно-кишечных расстройствах. Определение крови и кровяных пигментов. Эритроциты в свежей моче легко обнаружить под микроскопом. Кровяные пигменты (гемоглобин и его метгемоглобин, сульфгемогло- бин, а также миоглобин выявляют с помощью специальных проб. Б е н з иди новая К 2 мл раствора перекиси водорода добавляют капель свежеприготовленного насыщенного раствора бензидина в ледяной уксусной кислоте, размешивают и к смеси по каплям добавляют мочу. Окрашивание смеси вначале в а затем в синий цвет указывает на содержание в моче кровяных пигментов. Моча здоровых животных дает отрицательную реакцию на кровяные пигменты. Положительная реакция может быть в результате появления в моче крови, гемоглобина, а также миогло- бина. Нахождение крови в моче называют гематурией, которую регистрируют при нефритах, нефрозонефритах, инфарктах почек, мочекаменной болезни, цистите, С-гиповитаминозе, распаде опухолей в мочевой системе. Появление гемоглобина в моче именуют Она развивается у больных животных при гемоглобинемиях как болезней, острых отравлений, ожогов протекающих инфекционных болезней реакция для определениями о - в 5 мл испытуемой мочи прибавляют 2,8 г кристаллического сульфата аммония, после чего смесь фильтруют. Если фильтрат имеет красно-коричневый цвет, это значит, что в моче имеется миоглобина если фильтрат не присутствует гемоглобин. Определение индикана. В моче здоровых животных индикан содержится в незначительном количестве. Повышенное выделение индикана с мочой называют Наблюдают ее при интенсивном гниении белковых веществ в кишечнике (непроходимость кишечника а также при уси- распаде белков в организме опухоли и др.). Индикан в моче выявляют с помощью пробы Обермайера. В пробирку наливают 6 мл мочи и 6 мл раствора хлорного железа г хлорного железа растворяют в 100 мл концентрированной соляной кислоты. Через 5 мин добавляют мл хлороформа, после чего содержимое пробирки встряхивают. При наличии индикана хлороформ в нижней части пробирки В нормальной моче билирубин содержится в малых количества индикана. Определение желчных пигментов и кислот. Из желчных пигментов в моче могут присутствовать билирубин и тела. П роба билирубин по В пробирку берут мл исследуемой мочи и наслаивают водный раствор йода г кристаллического йода, 2 г калия йодида и 30 мл дистиллированной воды) или спиртовой раствор йода. При положительной реакции на границе между слоями жидкостей ляется зеленое кольцо. В нормальной моче билирубин содержится в малых количествах, не определяемых существующими реакциями. При обнаружении билирубина в моче говорят о (приме- ханической и паренхиматозной П роба нате л а по Богомолов у . В химический стаканчик берут мл мочи и добавляют мл насыщенного раствора сульфата меди. В случае помутнения пробыв нее вносят несколько капель концентрированной соляной кислоты до просветления. Через мин к содержимому стаканчика добавляют мл хлороформа и взбалтывают. При наличии тел слой хлороформа окрашивается от розово-красного до медно-красного цвета. С мочой здоровых животных выводится незначительное количество уробилиногеновых тел, которые при стоянии мочи переходят в тела. Повышенное количество тел называют билинурию отмечают при гемолизе в кровяном русле, напрамер при болезнях, отравлениях гемолитическими ядами, болезнях печении кишечника. Полное отсутствие тел указывает на механическую туху. Количество желчных кислот в моче значительно увеличивается при механической и паренхиматозной желтухах. З ан яти е ИССЛЕДОВАНИЕ ОСАДКА МОЧИ Цель занятия способ получения осадка мочи и из него для овладеть тех- осадка и навыки к элементов мочевого осадка. Материальное обеспечение. Микроскопы, центрифуги, предметные и кровные стекла мочи. Осадок мочи исследуют для диагностики болезней почек, четочников, мочевого пузыря и уретры. В осадке мочи обнаруживают лейкоциты, эпителий, цилиндры, кристаллы различных соединений, бактерии, грибы и др. Методы исследования осадка мочи. Осадок мочи исследуют ориентировочными количественным методами. Ориентировочный метод дает лишь приблизительное представление о содержании отдельных компонентов осадка мочи. Количественные методы позволяют определять содержание эритроцитов, лейкоцитов, цилиндров и других элементов осадка мочи, которые подсчитывают в счетных камерах. Наиболее рас- методы Амбурже, ко и др. Приготовление препарата осадка мочи. Лучше исследовать свежую мочу (не позднее 4 ч. С целью сохранения организованных осадков, особенно в теплое время, допускается консервирование проб мочи раствором формалина. В центрифужную пробирку наливают мл мочи, центри- фугируют мин при После центрифугирования оценивают видимый осадок по цвету, компактности. Перед приготовлением препарата центрифужную пробирку движением наклоняют для сливания надосадочной жидкости. Это следует проводить так, чтобы не нарушить осадок. Далее берут пипетку с тонким оттянутым концом с резиновым баллоном, осторожно суспензируют осадок в небольшом количестве мочи, помещают каплю на предметное стекло и осторожно накрывают ее покровным стеклом В приготовленном препарате недопустимы пузырьки а жидкость не должна выходить за пределы покровного стекла. Если осадок мочи состоит из нескольких слоев, то препараты готовят из каждого слоя в отдельности. Для обозначения количества кристаллов принято давать оценку большое, небольшое и незначительное. Дифференциация элементов осадка мочи. Элементы осадка мочи разделяют на две группы организованные (органические) и неорганизованные (неорганические) осадки. К первым относят эритроциты, лейкоциты клетки, цилиндры, ко вторым — кристаллы кислот и солей щелочной и кислой реакций, а также осадки, встречающиеся в пробах независимо от ее реакции (рис. 45, 46). В моче они могут быть в измененном и неизменном виде. Неизмененные эритроциты, содержащие гемоглобин, представлены в форме дисков желтовато-зеленого цвета. Измененные потерявшие большую часть гемоглобина, выглядят как бесцветные диски. Такие эритроциты выявляют в пробах с низкой относительной плотностью мочи и при долгом ее хранении измененные эритроциты в свежей моче находят при поражении почек (нефрите, новообразованиях При поражении дящих путей (уроцистит, мочекаменная болезнь) обнаруживают неизмененные эритроциты. Сморщенные эритроциты встречают в моче с высокой относительной плотностью. При микроскопии осадка мочи за эритроциты можно принять грибы или круглые кристаллы оксалатов. Характерный признак двойной контур и отсутствие зернистости. Дрожжевые клетки чаще овальные, с зеленоватым оттенком, собираются группами резко преломляют свет, при вращении микровинтом в них устанавливают концентрическую исчерчен- ность. Для дифференциации эритроцитов от грибов и оксалатов крупной формы в препарат из осадка мочи добавляют каплю раствора уксусной кислоты. Она растворяет эритроциты, а грибы и остаются в препарате. В моче здоровых животных могут встречаться единичные эритроциты не в каждом поле зрения (от 0 до При заболевании почек и путей часто развивается гематурия, степень которой может быть различной. Если моча от присутствия крови становится красной, то это значит, что в 1 мкл мочи содержится не менее 2500 эритроцитов. В этом случае говорят о макрогематурии. Если моча имеет нормальный Цвет, но при микроскопии ее обнаруживают такое состояние называют микрогематурией. В свежей моче с нормальной или большой относительной плотностью лейкоциты присутствуют в виде оваль- 10 Заказ № 1227 145 © б © © © © о © ® © о © Рис. 45. Важнейшие компоненты организованных осадков мочи — эритроциты и единичные лейкоциты, 2 — лейкоциты в разных стадиях набухания 3 — эпителиальные клетки из коциты и эритроциты 4 — эпителиальные клетки из почки 5 эпителиальные из мочеточника 6 — эпителиальные клетки из мочевого пузыря при уроцистите; /2 7 эпителиальные цилиндры, эпителиальные клетки и эритроциты эритроцитарные цилиндры, эритроциты и лейкоциты 9 гиалиновые цилиндры 10 — цилиндры из аммония — зернистые цилиндры и эпителиальные жироперерожденные клетки 12 — восковидные цилиндры Рис. 46 Неорганизованные осадки мочи 2 — углекислый кальций — (3 — большое — малое 5 — гиппуровая кислота 6 аммоний 0° 10 ft // 7 — щавелевокислый кальций, S — сульфат кальция S, 10 кристаллы кислоты 11, 12 — серых зернистых клеток. В пробах с низкой плотностью лейкоциты набухают и становятся более крупными. Моча здоровых животных содержит мало лейкоцитов, их обычно от 0 до 2 в поле зрения. Увеличение количества лейкоцитов в моче называют а выделение большого количества лейкоцитов в поле зрения) именуют пиурией. Лейкоциты могут происходить из почек и всех отделов моче- путей. Сочетание лейкоцитурии и резко выраженной протеинурии указывает на что лейкоциты почечного происхождения. Особенно много лейкоцитов бывает при пиелонефри- тах и циститах. У самок лейкоциты в мочу могут попасть из половых органов, поэтому при сборе мочи проводят их туалет В мочу они попадают из почечных канальцев, почечных лоханок, мочеточников, мочевого пузыря, уретры и половых органов. В осадке мочи различают плоские, цилиндрические (хвостатые) и круглые эпителиальные клетки Плоские эпителиальные крупные многоугольные тельца с хорошо выраженной зернистостью в цитоплазме и ядром Цилиндрические (хвостатые) эпителиальные клетки продолговатой формы, имеют зернистость в цитоплазме и четко видимое ядро. Такие клетки могут происходить из любого отдела мочевых путей Круглые эпителиальные зернистые тельца круглой формы с ядром в центре. Присутствие эпителиальных клеток в осадке мочи в большом количестве свидетельствует о воспалительном процессе в мочевой системе Наличие цилиндров в моче называют цилинд- рурией. Они формируются в почечных канальцах. Различают гиалиновые, восковидные, эпителиальные, эритроцитарные, лейкоцитарные, зернистые и жировые цилиндры. Гиалиновые цилиндры образуются из белка мочи, выпавшего в канальцах. Они имеют нежные контуры, прозрачны Восковид- ные цилиндры в отличие от гиалиновых обладают сильным лучепреломлением, слегка желтоватого цвета Эпителиальные цилиндры возникают в результате налипания на гиалиновый цилиндр отслоившегося канальцевого эпителия. цилиндры могут состоять сплошь из эритроцитов — цилиндрических сгустков, сформировавшихся в мочевых канальцах, и из эритроцитов, наслоившихся на гиалиновые цилиндры Гемогло- цилиндры образуются в почках из гемоглобина, выпавшего в осадок. Они зернистой структуры или бурого цвета. Лейкоцитарные цилиндры могут быть в результате налипания лейкоцитов на гиалиновые цилиндры или скопления лейкоцитов, склеенных фибрином или слизью Зернистые цилиндры возникают из распавшихся клеток канальцев почек. У этих цилиндров поверхность покрыта мелкими зернышками цилиндры образуются из перерожденного десквамиро- ванного эпителия почечных канальцев, состоят из капелек жира, видных при окраске Суданом III. Обнаружение цилиндров в моче служит признаком морфологических изменений в почках К ним относят длинные, нежные, лентовидные образования, состоящие из слизи. Они характеризуются наличием расщепленных концов и продольной исчерченностью. От прибавления уксусной кислоты цилиндроиды не растворяются в отличие от гиалиновых цилиндров. Единичные цилиндроиды в моче встречаются в норме, а значительное их количество находят при воспалительных процессах слизистой оболочки путей. К рис тал л ы , встречающиеся в моче щелочной Кристаллы фосфорнокислой аммиак-магнезии (три- пельфосфата) чаще бесцветные, в виде призм желтухе кристаллы трипельфосфата окрашиваются в желтый цвет. Фосфорнокислая аммиак-магнезия появляется в моче при уроцистите, аммиачным брожением в мочевом пузыре. Нередко кристаллы этой соли выпадают при длительном хра- проб мочи. Аморфные фосфорнокислые это фосфаты, фосфорнокислый кальций, фосфорнокислая магнезия. Кристаллы этих солей оседают в виде бесцветных шариков, нередко они встречаются в сочетании с кристаллами трипельфосфата. Фосфорнокислые соли по виду схожи с уратами, нов отличие от них не растворяются при нагревании мочи, а при охлаждении выпадают в большем количестве. Аморфные фосфорнокислые соли в моче ужи- вотных появляются при заболеваниях, сопровождающихся длительной рвотой кислого мочекислого аммония (биурата аммония) бывают в форме шаров желто-бурого цвета, а по периферии их расположены шипы. При нагревании мочи соль растворяется, а при охлаждении выпадает вновь аммоний в моче выкристаллизовывается при уроцистите, сопровождающемся аммиачным брожением мочи. Нейтральный фосфорнокислый магний (кристаллический фосфат магния, нейтральная фосфорнокислая магнезия, трехоснов- ная фосфорнокислая магнезия) представлен в виде кристаллических продолговатых ромбов. Кристаллы этой соли растворимы в уксусной кислоте и нерастворимы в щелочах. Углекислый это карбонат кальция, углекислая известь. Часто кристаллы этой соли в моче выпадают в виде шаров с концентрической исчерченностью, а иногда они похожи на барабанные палочки и розетки. Углекислый кальций в моче чаще обнаруживают в сочетании с кристаллами трипельфосфата и мочекислого аммония в кислой ил очной Кристаллы щавелевокислого кальция (щавелевокислой извести, оксалата кальция) чаще бывают в виде квадратов и напоминают по форме почтовые конверты. При желтухе эти кристаллы окрашиваются в желтый цвет. Они растворимы соляной кислотой и нерастворимы уксусной кислотой. Кристаллы оксалата кальция в свежевзятой моче появляются при формировании мочевых камней встречающиеся в кислой мочевой кислоты различны по форме и цвету. Они могут иметь желтый, желто-зеленый, бурый и буро-фиолетовый цвет. Форма ромбическая, бочкообразная, веретенообразная в форме розеток, гребней. Кристаллы выпадают при длительной лихорадке, почечной недостаточности, пневмонии и др соли в основном представлены кристаллами натриевых и калиевых солей мочевой кислоты, реже кальцием и магнием. При значительном количестве уратов в моче ее осадок становится бурым или красным. При подогревании ураты растворяются. Этот процесс происходит и при добавлении к моче соляной или уксусной кислоты, при этом образуются кристаллы мочевой кислоты. Такую пробу ставят для дифференциации уратов от фосфатов. Ураты под микроскопом выглядят в форме зернышек, окрашенных пигментами мочи, расположенных кучками. Осадок уратов выпадает при болезнях, сопровождающихся лихорадкой и обезвоживанием организма. Кристаллы фосфорнокислого кальция (кристаллического фосфата кальция, фосфорнокислой извести) под микроскопом имеют вид клина, полосок, которые, группируясь, становятся похожими на веера розетки. Кристаллы встречаются в моче здоровых животных, у при анемиях. Сернокислый кальций (сульфат кальция, сернокислая известь, гипс) встречается только в моче сильнокислой реакции. Кристаллы этой соли похожи на длинные бесцветные иглы, а иногда на призмы. Они растворяются аммиаком и уксусной кислотой. Кристаллы кислоты встречаются в виде ромбических призм, иногда принимают форму игл, табличек, звезд. Гип- кислота растворяется от добавления винного спирта кислоты в моче появляются при болезнях, сопровождающихся усилением гнилостных процессов в кишечнике. |